Oral Manifestations Associated to Paracoccidioidomicosis and Histoplasmosis

Objective: To determine the frequency and clinical forms of oral manifestations associated to Paracoccidioidomycosis (PCM) and Histoplasmosis. Material and Methods: 481 medical records of outpatients referred to the Medical Mycology Department were reviewed since 2009 to 2016. Data were analyzed using descriptive statistical methods. Results: 47 (9.77%) cases had oral manifestations, 29 (61.70%) were associated to PCM and 18 (38.29%) to histoplasmosis. For PCM, male-female ratio was 8:1 and 1:1 for histoplasmosis. The average age for PCM was 48 years old and 53 for histoplasmosis. All the PCM patients had more than 1 oral structure affected: 44.82% were gingival lesions and 27.58% palate. In patients with histoplasmosis, 6 (33.33%) were lesions affecting palate and 6 (33.33%) involving tongue. For both entities, painful ulcers and granulomatous-like lesions were the most prevalent clinical forms; however, we observed a wide range of other oral manifestations. Regarding PCM patient's comorbidities, 3 (10.34%) cases had HIV/AIDS, 8 (27.58%) histoplasmosis and 2 (6.89%) carcinomas. Whereas the comorbidities of patients with histoplasmosis, 2 (11.11%) had HIV/AIDS and 1 (5.55%) had carcinoma. Conclusion: In endemic countries for both mycoses, dentists must be aware of patients with mouth lesions, take advantage of epidemiologic clues that suggest risk factors and be acquainted with all the current diagnostic tests in order to make a quick diagnosis and treatment in highly suspicious cases.

Presentaciones atípicas de histoplasmosis: anemia hemolítica. Descripción de un caso y revisión de la literatura / Atypical presentations of histoplasmosis: hemolytic anemia. Case report and literature review

La histoplasmosis es una enfermedad granulomatosa, producida por Histoplasma capsulatum. Causa un amplio espectro de manifestaciones clínicas, la más frecuente es la pulmonar. En algunos casos se presentan formas diseminadas, con afectación de uno o múltiples órganos, con características atípicas, difíciles de reconocer. Reporte del caso: Se presenta el caso de un paciente masculino de 70 años de edad, procedente de Barinas, quien trabajó en una granja de gallinas, con diagnóstico de histoplasmosis y anemia hemolítica, las cuales se resolvieron con tratamiento antifúngico. Conclusiones: En Venezuela, zona endémica para esta micosis, el médico está obligado a tener un alto índice de sospecha acerca de la misma, teniendo en cuenta factores como la edad y la epidemiología. A la luz de nuestros conocimientos, es el tercer caso reportado.

Histoplasmosis is a granulomatous disease, produced by Histoplasma capsulatum. This fungus causes a wide range of clinical manifestations; the most common is the pulmonary form. In some cases, atypical presentations are described. Case report: a 70 year old male patient, from Barinas, Venezuela, who worked in a chicken farm, with diagnosis of histoplasmosis and hemolytic anemia is described. The patient improved with antifungal treatment. Conclusions: in Venezuela, an endemic area for this mycosis, clinicians must have a high suspicion index for this disease, taking into account risk factors, such as age and epidemiology. To our knowledge, this is the third case report in the literature.

Presentaciones atípicas de histoplasmosis / Atypical presentations of histoplasmosis

La histoplasmosis es una enfermedad granulomatosa, producida por Histoplasma capsulatum. Causa un amplio espectro de manifestaciones clínicas, la más frecuente es la pulmonar. En algunos casos se presentan formas diseminadas con afectación de uno o múltiples órganos, de características atípicas difíciles de reconocer. La patogenia de esta enfermedad es igual a la de tuberculosis y se ha descrito coinfección. Se reportan tres casos de histoplasmosis de presentación infrecuente: ancianos, coinfección con micobacterias, localizaciones atípicas y revisión de la literatura. El primer caso fue el de un paciente de 19 años de edad con absceso cerebral. El segundo y tercer caso correspondieron a personas mayores de 60 años, con coinfección por Histoplasma capsulatum y Mycobacterium sp, de presentación articular y enfermedad ginecológica, respectivamente. En Venezuela, zona endémica para esta micosis, el médico está obligado a tener un alto índice de sospecha acerca de la misma, teniendo en cuenta factores como la edad y la epidemiología. (Acta Med Colomb 2015; 40: 254-259).

Histoplasmosis is a granulomatous disease caused by Histoplasma capsulatum. It causes a wide spectrum of clinical manifestations, being the pulmonary the most common one. In some cases disseminated forms with involvement of one or multiple organs are manifested with atypical characteristics difficult to recognize. The pathogenesis of this disease is equal to that of TB and co-infection has been described. Three cases of infrequent presentation of histoplasmosis: elderly, co-infection with mycobacteria, atypical presentations and review of the literature are presented. The first case involved a 19-year-old with cerebral abscess. The second and third cases were for people over 60, co-infected with Histoplasma capsulatum and Mycobacterium sp, with joint involvement and gynecological disease, respectively. In Venezuela, endemic area for histoplasmosis, the doctor is required to have a high index of suspicion about this entity, taking into account factors such as age and epidemiology. (Acta Med Colomb 2015; 40: 254-259).

Concordancia entre los métodos del diagnóstico micológico de la paracoccidioidomicosis / Concordance between methods of mycological diagnosis of paracoccidioidomycosis

La paracoccidioidomicosis (PCM) es una enfermedad crónica, sistémica, granulomatosa, endémica en nuestro país, producida por un hongo dimorfo denominado Paracoccidioides brasiliensis. Existen numerosas técnicas para realizar el diagnóstico de esta entidad. Nos planteamos la posibilidad de realizar un estudio para determinar la concordancia que pudiese existir entre las diferentes técnicas que se utilizan para el diagnóstico de la PCM. Se realizó un registro de historias clínicas. Se evaluaron 251 historias clínicas de pacientes con diagnóstico de PCM, de la consulta externa de la Sección de Micología Médica “Dr. Dante Borelli” del IMT-UCV, entre los años 2000 y 2010. Se determinó la concordancia entre los métodos diagnósticos por medio del análisis de concordancia de atributos para datos binarios. Entre el examen directo y el cultivo, no hubo acuerdo. Entre la serología y el examen directo, se encontró que hubo equivalencia, así como entre el cultivo y la serología. No se pudo calcular correlación alguna con la histopatología, ya que no hubo datos negativos, en vista de que todas las muestras procesadas fueron positivas. El diagnóstico de la PCM se basa en la identificación y el aislamiento del hongo. Es obligatoria la realización del examen directo en fresco de toda muestra clínica. Nuestro estudio de muestra que deben realizarse todos los métodos que estén al alcance (examen directo en fresco, cultivo, serología, histopatología) a fin de aumentar la probabilidad de llegar a un diagnóstico certero de esta patología

Paracoccidioidomycosis (PCM) is a chronic, granulomatous disease, endemic in our country, produced by a dimorphic fungus, Paracoccidioides brasiliensis. Several techniques are used for the diagnosis. A study was performed to determine the agreement that could exist between the different techniques, used for the diagnosis of PCM. Clinical records of patients with diagnosis of PCM was made. 251 clinical records were reviewed, from the Sección de Micología Médica “Dr. Dante Borelli”, IMT- UCV, between 2000 and 2010. The agreement between the methods was determined by means of the analysis of agreement of attributes for binary data. Between direct examination and culture, there was no agreement. Between serology and direct examination, there was equivalence, as well as between culture and serology. Correlation could not be calculated with histopathology, since there were no negative data, due to the fact that all the processed samples were positive. The diagnosis of the PCM is based on the identification and isolation of the fungus. Direct examination is mandatory in all clinical samples. Our study demonstrates that all the methods must be performed (direct examination, culture, serology, histopathology) in order to increase the probability of reaching an accurate diagnosis

Concordancia entre el exámen directo en fresco y tres métodos de laboratorio para el diagnóstico de la paracoccidioidomicosis / Concordance between direct fresh examination and three laboratory methods for the diagnosis of paracoccidioidomycosis

La paracoccidioidomicosis (PCM) es una enfermedad crónica, sistémica, granulomatosa, restringida a la América Latina .En nuestro país, es una de las micosis endémicas más importantes. Es producida por un hongo dimorfo denominado Paracoccidioides brasiliensis. En el presente trabajo se realizo un estudio retrospectivo de los pacientes con PCM, proveniente de la consulta externa de la Sección de Micología Médica "Dr. Dante Borelli" del Instituto de Medicina Tropical de la Universidad Central de Venezuela, en el lapso comprendido entre 2000-2010 con la finalidad de evaluar la consistencia diagnóstica del examen directo en fresco, el cultivo, la serología, y la histopatología. Se encontró que no hubo correlación entre los métodos o que esta fue muy baja; en tal sentido se recomienda que para el diagnóstico adecuado de la PCM es necesario utilizar los métodos en conjunto y que un resultado negativo de cualquiera de los métodos, no descarta la enfermedad, mientras que un resultado positivo lleva al diagnóstico de la misma

Paracoccidioidomycosis (PCM) is a chronic, systemic, granulomatous disease, restricted to Latin America. In our country, it is one of the most important endemic mycosis. It is produced by a dimorphic fungus named Paracoccidioides brasiliensis. In the present study, a retrospective of PCM patients was carried out, at the Section of Micología Médica "Dr. Dante Borelli", Instituto de Medicina Tropical, Universidad Central de Venezuela, between 2000-2010, with the purpose of evaluating the consistency of direct examination, related to other methods: culture, serology, and histopathology. We found that there was no correlation between the methods or that this was very low; in this regard it is recommended that for the proper diagnosis of PCM the use of all methods is required and that a negative test result does not rule out the disease, while a positive result by any of them leads to the diagnosis, taking into account the potential of each of the methods.

Paracoccidioidomicosis: clínica, epidemiología y tratamiento / Paracoccidioidomicosis: clinical considerations, epidemiology and treatment

Objetivo: caracterizar desde el punto de vista clínico, epidemiológico y de tratamiento, los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis evaluados en la Consulta Externa de la Sección de Micología Médica del IMT-UCV y procedentes de otros hospitales del área de la Gran Caracas, cuyas muestras fueron procesadas en dicha Sección, entre los años 2001-2011. Métodos: estudio descriptivo de registros, donde se tomaron en cuenta las historias de los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis. Resultados: la relación hombre:mujer obtenida fue de 6,5:1, sólo el 29,16% de los pacientes tenían ocupaciones agrícolas. Los síntomas más frecuentes fueron tos (50%) y pérdida de peso (45,06%) y los signos más comunes fueron lesiones en orofaringe (53,6%) y adenopatías (27,2%). 7,65% cursaron concomitantemente con infección por VIH/SIDA, 5,61% con tuberculosis y 6,63% con histoplasmosis. En cuanto al diagnóstico, el examen directo fue positivo en 87,5% de los casos, el cultivo en el 62,90% y la serología en el 88,46%. La mortalidad general fue de 4,11%. Discusión: La paracoccidioidomicosis es una enfermedad que puede ocurrir en pacientes inmunocompetentes e inmunocomprometidos; tiende a observarse ahora con mayor frecuencia en los pacientes con SIDA. El número de casos entre los pacientes del sexo femenino ha aumentado. La investigación acerca del lugar de origen, de la procedencia y la ocupación del paciente es importante a la hora de plantearse el diagnóstico. Esto debe ser tomado en consideración en un país endémico como el nuestro. Su diagnóstico es relativamente fácil en manos de personal entrenado.

Objective: to characterize from the clinical, epidemiological and treatment viewpoints, patients diagnosed with paracoccidioidomycosis and evaluated in the outpatient clinic of the Medical Mycology Section, at the IMT-UCV and from other hospitals in the greater Caracas area, whose samples were processed in this section between 2001-2011. Methods: descriptive study of records, taking into account the histories of patients diagnosed with paracoccidioidomicosis. Results: the male:female ratio obtained was 6.5:1; only 29.16% of the patients had agricultural occupations. The most common symptoms were cough (50%) and weight loss (45.06%), and the most common signs were oropharyngeal lesions (53.6%) and adenopathy (27.2%). Concomitantly, 7.65% had HIV/AIDS infection, 5.61% tuberculosis and 6.63% histoplasmosis. In terms of diagnosis, the direct exam was positive in 87.5% of cases, the culture in 62.90% and serology in 88.46%. Overall mortality was 4.11%. Discussion: paracoccidioidomycosis is a disease that can occur in immunocompetent and immunocompromised patients; currently, it tends to appear more frequently in patients with AIDS. The number of cases among female patients has increased. Research about the place of birth, the origin and the occupation of the patient is important when considering the diagnosis; this should be taken into consideration in an endemic country like Venezuela. Its diagnosis is relatively easy in the hands of trained personnel.

Detección e identificación de Candida dubliniensis por métodos fenotípicos en estomatitis sub-protésica: reporte de un caso / Detection and identification of methods for phenotypic Candida dubliniensis in denture stomatitis: report of case

La Estomatitis Sub-Protésica es una afección comúnmente observada en sujetos portadores de prótesis dentales removibles. Son numerosos los reportes publicados en los que se asocia esta patología con la presencia de hongos del Género Candida, y particularmente con Candida albicans. No obstante, algunas cepas identificadas como C. albicans, pudieran no tratarse en realidad de este microorganismo sino de Candida dubliniensis, más aún si se toma en cuenta que ambas especies producen clamidoconidias. Es por ello que resulta necesario comparar distintos métodos fenotípicos que permitan diferenciar en buena medida a ambas especies. En este artículo se describe el caso de una paciente portadora de prótesis removible superior con diagnóstico clínico de Estomatitis Sub-Protésica, a quien se le tomó muestras del paladar afectado y de la prótesis implicada. Se emplearon diferentes métodos fenotípicos de identificación diferencial de ambas especies, entre estos: CHROMagar Candida, Agar tabaco, Agar Pal´s, Agar Tween 80, medio de tomate y zanahoria y de Agar Sabouraud con NaCl al 6,5% (P/V). También se realizaron la pruebas de termotolerancia a 45ºC, aglutinación en latex, así como la identificación a través del sistema ID 32C (bioMerieux). Una vez empleados los métodos antes mencionados, la especie encontrada en el paladar de la paciente fue C. dubliniensis, en tanto que la que se halló en la prótesis fue C. albicans, siendo esta la primera vez que se detecta e identifica en nuestro país a C.dubliniensis en pacientes que presentan esta patología bucal.

Denture stomatitis is a condition commonly observed in subjects with removable dentures. There are numerous reports published in which this disease is associated with the presence of fungi of the genus Candida, particularly Candida albicans. However, some strains identified as C. albicans, may not actually be this organism but Candida dubliniensis, especially if one takes into account that both species produce clamidoconidias. That is why it is necessary to compare different phenotypic methods to differentiate largely to both species. This article describes the case of a patient with upper removable prosthesis with a clinical diagnosis of Denture Stomatitis, whom he took samples of the palate is affected and the prosthesis involved. Different methods were used phenotypic differential identification of both species, among them: CHROMagar Candida Agar snuff, Pal's Agar, Tween 80 Agar, tomato and carrot medium, and Sabouraud Agar with 6.5% NaCl (P / V ). Also thermotolerance tests performed at 45 ° C, latex agglutination, and identification by ID 32C system (bioMerieux) were used. Once employed the above methods, the species found in the mouth of the patient was C. dubliniensis, whereas that was found in the prosthesis was C. albicans, marking the first time it is detected and identified in our country C.dubliniensis in patients with this oral pathology.

Estudio de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en el área de la Gran Caracas Venezuela / Study paracoccidioidomycosis diagnosed cases of childhood in the area of Greater Caracas Venezuela

La paracoccidioidomicosis pocas veces afecta niños y no es de denuncia obligatoria. Su verdadero impacto en la población infantil es desconocido. El objetivo fue determinar en número de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en centros de salud de la Gran Caracas, en niños con edades entre 0-15 años. Se evaluaron historias de niños con paracoccidioidomicosis, provenientes de hospitales de la Gran Caracas. Se revisaron 420 historias con diagnóstico de paracoccidioidomicosis, de las cuales 33 (7,9%) fueron niños menores de 15 años, siendo la media de edad 7,97 años. El género masculino predominó (69,7%), la razón masculino-femenino fue 1,5:1 en niños con edades de 0-7 años y 5,5:1 entre 8-15 años. La mayoría procedían del estado Miranda, 11 (35,5%) seguido del Distrito Capital 9 (29,1%). En 26 casos se clasificó la enfermedad, encontrando que 24 (92,3%) desarrollaron la forma aguda. Las principales manifestaciones clínicas precisadas en 25 historias fueron: fiebre 18 (72%) adenomegalias 16 (64%), hepatomegalia 12 (48,0%) y esplenomegalia 11 (44%). De 24 casos que tenían datos de laboratorio se observó que la eosinofilia y la anemia fueron los principales hallazgos. El diagnóstico micológico se realizó por serología en 24 (72,7%) casos, biopsia 11 (45,8%), examen directo 3 (12,5%) y cultivo 1 (4,2%). La paracoccidioidomicosis infantil es una entidad infrecuente, la cual se observa en 7,9% de los casos. Las manifestaciones más frecuentes son fiebre, adenomegalias y hepatoesplenomegalia. El diagnóstico de la paracoccidioidomicosis aguda infantil, siempre debe ser considerado en niños con edades de 0-15 años, en Venezuela.

Paracoccidioidomycosis rarely affects children, and it is not a notifiable disease. Its real impact in the child population is unknown. The aim of the study was to determine the number of paracoccidioidomycosis cases diagnosed in various health centers in Great Caracas, in children between 0-15 years. We reviewed 420 records with diagnosis of paracoccidioidomycosis from Hospital of Caracas. 33 (7,9%) were from children less than 15 years old. Age average 7,97 years. Male gender accounted for 69.7%, with a male: female relation of 1.5:1 in children between 0-7 years and 5,5:1 between 8-15 years. Most of the patients 11 (35,5%) came from Miranda state, followed bu Distrito Capital 9 (29,1%). In 26 patients the disease could be classified, from which 24 (92,3%) developed the acute form. Clinical manifestations, recorded in 25 cases were: fever 18 (72%), enlarged lymph nodes 16 (64%), hepatomegaly 12 (48,0%) and splenomegaly 11 (44%). From 24 cases in which laboratory data was recorded, eosinophilia and anemia were the most relevent findings. Mycological diagnosis was performed by serology in 24 (72,7%) cases, biopsy 11 (45,8%), direct examination 3 (12,5%) and culture 1 (4,2%). Child paracoccidioidomycosis is a rare disease, observed in 7, )% of cases. Most relevant clinical manifestations are fever, enlarged lymph nodes and hepatosplenomegaly. Acute paracoccidioidomycosis must be considered as a possible diagnosis in children between 0-15 years, in endemic countries such as Venezuela.

Histoplasmosis: a study of 158 cases in Venezuela, 2000-2005.

Histoplasmosis, a granulomatous disease caused by Histoplasma capsulatum, is endemic in Venezuela. We conducted the current study to appraise retrospectively the demographic data, clinical features, diagnostic methods, and treatment of patients with histoplasmosis from January 2000 to December 2005. We reviewed the medical records of outpatient cases with a diagnosis of histoplasmosis and considered clinical samples processed at our laboratory. We collected demographic, epidemiologic, and clinical data from each case as available, including results of any mycologic examinations performed. Treatment and outcome data were available for some patients. We assessed 158 cases of histoplasmosis: 103 (65.2%) patients came from the Caracas metropolitan area; 53 were associated with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), 14 with tuberculosis, and 8 with paracoccidioidomycosis. Six pediatric patients were malnourished. Epidemiologic data suggested histoplasmosis in most cases. Patients received treatment with itraconazole and/or amphotericin B. Our results may reflect changes in the epidemiology occurring in Venezuela, perhaps due to environmental changes and the presence of AIDS. Several mycologic exams are necessary to ensure a proper diagnosis. More reliable data and statistics on this infection are necessary to monitor outbreaks closely and to establish if there is an epidemic pattern.

Cryptococcus spp. en Venezuela y su relación con el biotipo del MicroScan® / Cryptococcus spp. in Venezuela and its relationship with the MicroScan® biotype

El lector del panel microbiológico automatizado autoScan®-4 detecta el crecimiento del hongo en diversos sustratos bioquímicos, presentes en los pozos de los paneles del MicroScan®. El propósito de este estudio fue relacionar el ¨biotipo¨ identificado por el MicroScan® con la especie causante de criptococosis, con el objeto de permitir una identificación en el menor tiempo posible. Se evaluaron 82 cepas de Cryptococcus spp. aisladas a partir de muestras clínicas entre 1995 y 2004. Para garantizar la pureza de las cepas, se realizó la identificación de las mismas por métodos convencionales; para identificar las especies se utilizó el medio L-canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB). Se utilizó también el panel de identificación rápida de levaduras del MicroScan®, con el fin de determinar el ¨biotipo¨. El MicroScan® reveló 27 diferentes ¨biotipos¨. De los 82 aislados tipificados con el uso del medio CGB, el 91,46 % correspondieron a C. neoformans y 8,54 % a C. gattii. No se encontró una diferencia significativa entre los ¨biotipos¨ y las especies (p>0,05). Sin embargo, se encontró significancia estadística entre las especies C. gattii y C. neoformans y la asimilación de p-nitrofenil-N-acetil-ß-D-glucosamina (NAG) (p<0,05). El panel de identificación rápida de levaduras del MicroScan® no fue capaz de diferenciar ambas especies.

The automated reader of the AutoScan® -4 microbiological panels detects fungi growth in various biological substrates present in the MicroScan® panel wells. The purpose of this study was to relate the biotype identified by the MicroScan® with the species causing the criptococcosis, in order to obtain identification in the shortest possible period. The evaluation included 82 Cryptococcus spp. strains isolated from clinical samples between 1995 and 2004. To guarantee the purity of the strains they were also identified by conventional methods; to identify the species we used L-canavanin-glycine-bromthymol blue medium (CGB). We also used the fast yeast identification MicroScan® panel with the purpose of determining the “biotype”. The MicroScan® revealed 27 different “biotypes”. Of the 82 isolates typed with the CGB medium, 91.46% corresponded to C. neoformans and 8.5% to C. gattii. No significant difference was found among the “biotypes” and the species (p<0,05). Nevertheless, there was a statistically significant difference between the assimilation of p-nitrophenil-N-acetyl-ß-D-glucosamine (NAG) (p<0.05) by the C. gattii and the C. neoformans species. The fast yeast identification MicroScan® panel was not able to differentiate between both species.

Determinación de un medio de cultivo apropiado para acelerar el crecimiento de paracoccidioides brasiliensis / Determination of an appropriate culture medium to accelerate the growth of paracoccidioides brasiliensis

A pesar de los avances de la tecnología en los últimos años, en una infección micótica la "prueba de oro" para realizar el diagnóstico definitivo, es el aislamiento del agente causal mediante la práctica del cultivo de una muestra clínica; por lo que a través de los años han sido elaborados numerosos medios de cultivo, en los cuales se han utilizado desde sustancias naturales, hasta otras artificiales de composición más compleja. El problema más importante al cual se enfrentan los laboratorios de micología médica, es que los hongos productores de micosis profundas en Venezuela, tienen la propiedad de ser de lento y difícil crecimiento, inclusive hasta 8 semanas son necesarias para poder visualizar estructuras características del agente investigado. Es por ello que es importante desarrollar un medio de cultivo que aumente la sensibilidad de recuperación de hongos dimorfos, como el P. brasiliensis, a partir de muestras clínicas y provenientes de la micoteca; y que a su vez pueda ser utilizado para la obtención de la fase de levadura en forma eficaz. Se procesaron dos muestras clínicas y dos cepas provenientes de la Micoteca de la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical, los cuales fueron sembrados en: Sabouraud, agar cerebro corazón (brain heat), agar Kelley y agar Kelley Modificado a temperatura ambiente para obtener la fase micelial y a 37° C para incluir la transformación térmica y así recuperar la fase de levadura. En relación al crecimiento a temperatura ambiente, de las muestras clínicas se observó el crecimiento de una colonia característica de P. brasiliensis entre el séptimo día y la sexta semana en el siguiente orden: agar Kelley, agar Kelley modificado, agar brain heart y Sabouraud. En el caso de dos cepas provenientes de la micoteca a su desarrollo fue casi similar en Agar Kelley y Brain heart. Para la transformación a fase de levadura ésta se obtuvo antes de los 7 días con el agar Kelley Modificado y el agar Kelley.

Identificación de histoplasma capsulatum en muestras clínicas mediante la técnica de PCR en dos rondas / Detection of histoplasma capsulatum by nested-PCR in clinical specimens

La histoplasmosis es una micosis profunda de distribución mundial cuyo diagnóstico se fundamenta en estudios clínicos, micológicos e inmunológicos. La identificación del agente etiológico en muestras biológicas es difícil de realizar. Se evaluó la técnica de PCR en dos rondas para identificar ADN de Histoplasma capsulatum en muestras clínicas (sangre y médula ósea) y cultivos del hongo. Se ensayaron 3 métodos de aislamiento de ADN basados en los reactivos Tiocianato de Guanidina, Cloruro de Bencilo y Triton-X-100. La técnica de aislamiento con Tiocianato de guanidina resultó de fácil aplicación en muestras clínicas. Sin embargo, se obtuvo un mayor rendimiento de ADN con el reactivo Triton-X-100. La aplicación de la prueba de PCR generó un amplificado de 210 pares de bases el cual fue identificado tanto en las cepas de referencia de H. capsulatum como en 5 muestras de sangre y 2 muestras de médula ósea. Para confirmar la especificidad de la prueba se analizaron cepas de otros hongos no relacionados, Paracoccidioides brasiliensis, Candida glabrata, Cryptococcus neoformans y Coccidioides immitis (C posadasii) las cuales resultaron negativas. La técnica de PCR mostró una sensibilidad de hasta 10pg de ADN de H. capsulatum confirmándose así su utilidad como herramienta de diagnóstico molecular.

El embarazo como única condición subyacente de una criptococosis: a propósito de 2 casos / The pregnancy like only underlying condition of a criptococosis: a purpose of 2 cases

Rara vez el embarazo ha sido asociado con criptococosis. Se presentan 2 pacientes VIH seronegativas, hospitalizadas en el Hospital Universitario de Caracas por presentar criptococosis meníngea, en las cuales la única condición subyacente fue el embarazo. Se hace una revisión de la literatura.

Susceptibilidad antifúngica en dermatofitos / Antifungal susceptibility of dermatophytes

No existe hasta los momentos una prueba estandarizada para realizar la susceptibilidad antifúngica de los dermatofitos. El objetivo de este estudio fue implementar la técnica de los pozos de difusión para el estudio de la susceptibilidad de los dermatofitos. Se utilizaron un total de 100 aislados de dermatofitos (74 Trichophyton rubrum, 18 Trichophyton mentagrophytes, 1 Trichophyton tonsurans, 5 Microsporum canis y 2 Epidermophyton floccosum) provenientes de muestras clínicas aisladas e identificadas en la Sección de Micología Médica, IMT. Se empleó la técnica de los pozos de difusión con los siguientes antimicóticos: Griseofulvina, Terbinafina, Fluconazol e Itraconazol. Se aplicaron los criterios de interpretación acordados por la NCCLS. El inóculo, se estandarizó utilizando el peso como unidad. El medio Agar Staib demostró ser el más adecuado, al obtenerse un mejor crecimiento de los aislados en un 97%. Esta es la primera vez, que se utiliza el peso como medida para cuantificar el inóculo en los dermatofitos. La mayor sensibilidad se evidenció ante Terbinafina seguido de Griseofulvina e Itraconazol. No se demostró sensibilidad alguna ante el Fluconazol. Sin embargo se requieren más estudios en los cuales se relacione la susceptibilidad "in vitro" con los resultados "in vivo".

Estudio de 40 casos de Histoplasmosis en niños y revisión de la literatura / Study of 40 cases of histoplasmosis in children and literature review

En niños, la histoplasmosis es la micosis profunda más frecuente en nuestro país. No es de denuncia obligatoria, por lo que existe un gran subregistro. El objetivo de este trabajo es reportar los casos de histoplasmosis diagnosticados en niños en la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical (IMT). Universidad Central de Venezuela (UCV), entre julio 2004 y julio 2005, con la finalidad de dar a conocer los principales aspectos de esta entidad a la población médica, en especial a los pediatras. Se evaluaron los pacientes en edad pediátrica (0-18 años) que fueron traídos a la consulta de la Sección y las muestras biológicas que se recibieron en el lapso antes mencionado. Se realizó examen mitológico y se siguió la evolución con el tratamiento. Se encontraron 40 casos de histoplasmosis con edades comprendidas entre 14 días y 16 años, 15 del genero femenino y 25 del genero masculino. Seis eran menores de 1 año, la mayoría (25 casos) provenientes del Distrito capital. Dieciocho presentaron la forma de histoplasmosis diseminada de los cuales 4 fallecieron. Quince presentaron la forma pulmonar aguda y 5 meningitis crónica. Seis pacientes estaban desnutridos, 4 presentaron VIH y 4 tenían tuberculosis. En 18 pacientes se desconoce comorbilidad. Nueve pacientes tenían aumento de la VSG, 7 anemia, 5 leucopenia y 2 pancitopenia. Los datos epidemiológicos fueron sugestivos de histoplasmosis en todos los casos. Se reportaron 40 casos de histoplasmosis en niños, diagnósticados en la Sección de Micología Médica del IMT-UCV. La forma clínica más frecuente fue la histoplasmosis diseminada. Ante la presencia de niños con las características descritas, debe pensarse en histoplasmosis como diagnóstico diferencial, relacionando la epidemiología, clínica, radiología y exámenes de laboratorio. Es necesario practicar mitológico para confirmar la presencia de esta enfermedad.

Candida spp en pacientes VIH/SIDA / Candida spp in patient VIH/SIDA

La candidiasis es la infección fúngica más frecuente en pacientes VIH seropositivos y con SIDA, siendo C. albicans la especie que predomina. En estos pacientes, la candidiasis se manifiesta más comúnmente como orofaringitis, con una incidencia que oscila entre 45 por ciento y 95 por ciento de todos los casos. En Venezuela son pocos los reportes que existen acerca de esta entidad en pacientes VIH/SIDA, por lo cual uno de los objetivos de esta investigación fue evaluar este aspecto. Se estudió una cohorte de 402 pacientes con VIH/SIDA con o sin orofaringitis y con o sin tratamiento antifúngico. Las especies de Candida más importantes aisladas fueron: C. albicans (80,41 por ciento), C. tropicalis (8,78 por ciento), C. glabrata (4,90 por ciento), C. dubliniensis (3,26 por ciento). Se evaluó la susceptibilidad de los diferentes aislados a las drogas antifúngicas con el método de la NCCLS y el método de los pozos de difusión. El 37,5 por ciento C. albicans provenientes de pacientes con tratamiento antimicótico fueron resistentes al fluconazol (resistencia secundaria) y 23,95 por ciento mostraron también resistencia al itraconazol (resistencia cruzada). Los ailados obtenidos se tipificaron a través de la reacción en cadena de la polimera (RAPD) y se estableció la que la misma representa una técnica útil para diferenciar Candida spp. En esta cohorte de pacientes evaluados, las características clínicas y demográficas son similares a las reportadas mundialmente, y que desde la introducción del TARGA, la frecuencia de las infecciones por Candida spp disminuyó. Hasta la presente fecha, en Venezuela no se había reportado el hallazgo de C. dubliniensis (3,26 por ciento).

Candida dubliniensis en pacientes VIH/SIDA: en Venezuela / Candida dubliniensis in patient VIH/SIDA: in Venezuela

En los últimos años, las enfermedades producidas por hongos han ido en aumento, debido en gran parte a la aparicón del síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El incremento de estas micosis ha sido más notable en aquellas causadas por especies del género Candida, las cuales trae consigo una elevada morbi-mortalidad. Otras especies no-albicans tales como, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida guillermondii y más recientemente Candida dubliniensis pueden estar involucradas en cualquier tipo de candidiasis. Esta última especie presenta características fenotípicas similares a C. albicans, siendo una de la más resaltante la producción de abundantes clamidoconidias. Candida dubliniensis al estar estrechamente relacionada desde el punto de vista fenotípico con C. albicans, hace dificultosa su identificación, sobre todo con los métodos convencionales de laboratorio y usualmente se ha identificado erróneamente como C. albicans. Actualmente existen múltiples opciones para una identificación presuntiva de C. dubliniensis, como es el caso de la utilización de paneles de identificación automatizada, medios cromogénicos (CHROMagar Candida), el uso del agar Staib, la prueba de la termotolerancia, entre otros; adicionalmente se pueden utilizar métodos de biología molecular los cuales son más específicos y sencibles para realizar una identificación definitiva de C. dubliniensis, permitiendo así por primera vez, la identificación fenotípica y genotípica de C. dubliniensis y el reporte de casos de candidiasis orofaríngea originada por C. dubliniensis en pacientes virus de inmunodeficiencia humana/síndrome de inmunodeficiencia adquirida en nuestro país.

Detection of Candida dubliniensis in Venezuela.

Over the past decades there has been a significant increase in fungal infections caused by Candida species, and continues to be common in immunocompromised individuals infected with the human immunodeficiency virus (HIV). Although Candida albicans remains the fungal species most frequently isolated as an opportunistic oral pathogen, other non-albicans are often identified in this cohort of patients, including C. dubliniensis. This yeast is closely related to and shares many phenotypic characteristics with C. albicans. Colonies of these two species appear morphologically identical when not grown on special media. The shared phenotypic characteristics of C. dubliniensis and C. albicans suggest that many C. dubliniensis isolates may have been misidentified as C. albicans in the past. The present studies aim is to recover and identify C. dubliniensis, and presumptive clinical C. albicans, from the oral cavities of HIV-seropositive individuals, comparing conventional media to obtain a simple, low-cost and reliable identification system for C. dubliniensis. A total of 16 isolates (3,98%) had been obtained from 402 HIV infected individuals with recurrent oropharyngitis and were identified as C. dubliniensis. Out of these C. dubliniensis isolates 19% were resistant, with MICs above 64 microg/ml to fluconazole. This constitutes, to the authors knowledge the first recovery of this organism in Venezuela.

Tinea nigra: report of twelve cases in Venezuela.

Tinea nigra is a superficial mycotic infection produced by Hortaea werneckii, formerly known as Phaeoannelomyces werneckii, formerly known as Exophiala werneckii, and Stenella araguata, the latter autochthonous in Venezuela, it was first described and named as Cladosporium castellanii in 1973. The present report describes 12 cases in the period of 1972-2002, diagnosed at the Medical Mycology Section at the Tropical Institute of the Universidad Central de Venezuela, in Caracas. This mycosis is more prevalent among young people, with fair skin, from 3 to 28 years of age, who visited beaches and in whom the lesions are more evident. Out of these 12 patients, 8 (66.66%) had Phaeoannelomyces werneckii as the causal agent and 2 (16.67%) Stenella araguata was isolated. Two patients had more than one macule, and curiously in these cases, each lesion was caused by a different species of the aforementioned fungus.

Neonatal candidiasis in Venezuela: clinical and epidemiological aspects.

A prospective study of the clinical and epidemiological aspects of Candida spp. sepsis was performed to assess the frequency, etiology, and risk factors in the neonatology service of the Pediatrics Hospital "Dr. Elías Toro" (2002-2003). Forty four out of 128 neonatal intensive care patients, with clinical sepsis and suspected fungal etiology, were chosen randomly for this study. Infant blood, urine, gastrointestinal tract, oral and skin samples were cultured. Samples were also taken from health care worker hands and the environment. The antifungal susceptibility patterns of the isolates were evaluated. The prevalence of Candida spp. from the clinical samples was: C. albicans (72.06%), C. parapsilosis (13.24%), C. tropicalis (10.29 %), C. guilliermondii (2.94%), and C. glabrata (1.47%). Due to the similarity of the susceptibility pattern of some isolates from infants and health care workers, we speculate a horizontal nosocomial infection. Statistical analysis revealed the following significant risk factors associated with Candida spp. isolation: prolonged hospitalization (p < 0.05), missing prenatal birth control (p < 0.05), and parenteral nutrition (p < 0.05). Blood cultures were all negative for bacteria and only 2.90% were positive for Candida spp. All 44 neonates receiving empirical therapy with amphotericin B (0.5-1.0 mg/k/day) evolved satisfactorily.